外泌體研究常見問題解答105.外泌體研究，應選用血漿還是血清？血清是血液凝固之后收集的液體，所以其中少了纖維蛋白原，凝血因子，以及多了很多凝血產(chǎn)物。纖維蛋白原可轉(zhuǎn)化為纖維蛋白，具有凝血功能。在凝血過程中血小板會分泌大量的外泌體，有研究發(fā)現(xiàn)血清中有接近50%的外泌體來自額外的分泌。血漿=血液-血細胞血清=血漿-纖維蛋白原-凝血因子所以一般實驗選擇血漿，在特殊情況下，如研究與血小板相關(guān)的疾病的時候，當然是血清更適合。6.外泌體血液樣本提取需注意事項？全血在長時間放置，冷凍、離心等會發(fā)生溶血現(xiàn)象，此時不建議分離外泌體。7.細胞培養(yǎng)去除血清源外泌體？a.將細胞培養(yǎng)用的血清通過100000g超速離心10h，去除血清外泌體；b.選擇無血清培養(yǎng)基進行細胞培養(yǎng)。c.使用商業(yè)化的無外泌體胎牛血清（WSC0020）8.如何提取組織細胞外泌體？將組織剪成小塊，在無血清培養(yǎng)基中培養(yǎng)12h；轉(zhuǎn)移至離心管中，4℃3000g離心20min去除培養(yǎng)液中雜質(zhì)和細胞碎片，將上清液用0.45μm過濾，接著用0.2μm過濾，然后選擇合適的外泌體分離方法。外泌體不具備自我復制能力，使用過程安全，不會出現(xiàn)異常增殖風險。蘋果sEVs裝載

外泌體并非細胞代謝的廢棄物，而是維持機體正常生理功能的重要調(diào)控因子，參與機體生長發(fā)育、免疫穩(wěn)態(tài)、組織修復、代謝調(diào)控等多個**生理過程。在胚胎發(fā)育階段，母體與胎兒之間通過外泌體傳遞信號，調(diào)控胚胎著床、胎盤發(fā)育與***分化，保障胚胎正常生長；在免疫系統(tǒng)中，免疫細胞分泌的外泌體能夠傳遞抗原信息，***或抑制免疫細胞活性，維持免疫耐受與免疫平衡，避免自身免疫反應的發(fā)生；在組織修復與再生過程中，干細胞分泌的外泌體可靶向遷移至受損組織，抑制炎癥反應，促進血管生成，***局部細胞的增殖與分化，加速創(chuàng)面愈合與組織修復，且效果與干細胞移植相近，同時規(guī)避了干細胞移植的免疫排斥、**形成等風險。此外，外泌體還參與神經(jīng)系統(tǒng)的信號傳遞、代謝廢物的***、細胞能量代謝的調(diào)控等過程，是維持機體穩(wěn)態(tài)不可或缺的“細胞信使”，貫穿生命活動的全過程。側(cè)柏sEVs臨床試驗標準化檢測體系逐步建立，用于評定外泌體產(chǎn)品的活性、純度與穩(wěn)定性。

外泌體的保存是否重要？在外泌體研究中，儲存穩(wěn)定性是一直困擾廣大科研工作者的難題。目前外泌體一般在PBS中，置于-80℃分裝凍存，但隨著凍存時間和凍融次數(shù)的增加，將會嚴重影響外泌體的活性、完整性、貨物含量等。針對上述難點，維思克思開發(fā)出外泌體的凍存保存液，直接混入外泌體樣本中，置于-20℃、-80℃凍存，可明顯改善儲存樣品的短期和長期穩(wěn)定性。產(chǎn)品特點：操作簡便，可直接混入外泌體樣本中，無需過多操作。保護效果好，使用后外泌體生物活性穩(wěn)定，多次凍融后外泌體顆粒數(shù)、表面標志物蛋白均無明顯差異。適用樣本范圍廣，可適用于所有外泌體樣本（包括植物、動物、微生物、人來源外泌體）。產(chǎn)品信息：WisExoExosomeProtector（WSR0020）

盡管外泌體基礎(chǔ)研究呈現(xiàn)式增長，其臨床轉(zhuǎn)化仍處于萌芽階段。截至當前，全球已有數(shù)十項注冊臨床試驗，主要集中在腫瘤免疫***、再生醫(yī)學和疫苗開發(fā)領(lǐng)域。**為**的進展包括：樹突狀細胞來源外泌體用于非小細胞肺*的免疫***（已完成Ⅱ期臨床），間充質(zhì)干細胞外泌體用于***急性移植物抗宿主病和難治性潰瘍，以及植物外泌體作為口服藥物遞送載體的探索性試驗。然而，臨床轉(zhuǎn)化面臨的根本性障礙在于缺乏統(tǒng)一的標準化體系。具體表現(xiàn)為：分離方法多樣導致不同批次外泌體的純度、產(chǎn)量、功能存在差異；缺乏公認的效價測定方法，難以定義“活性”外泌體的單位；表征指標不一，多數(shù)研究未嚴格遵循國際細胞外囊泡學會的比較低實驗要求；規(guī)模化生產(chǎn)缺少符合藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范的工藝流程。為此，國際學界和監(jiān)管機構(gòu)（如美國食品藥品監(jiān)督管理局、歐洲藥品管理局）正在推動外泌體產(chǎn)品的標準化指南，明確關(guān)鍵質(zhì)量屬性（粒徑分布、標志物表達、載藥量、無菌性等），并倡導建立參考品和外泌體功能測定的國家標準，為臨床轉(zhuǎn)化鋪平道路。借助活性成分運載能力，外泌體可提升護膚營養(yǎng)成分的滲透與吸收效率。

外泌體是科學研究的熱點，可怎么才能追蹤到外泌體在體內(nèi)的蹤跡呢？很多研究者都被這一點給難住了。盡管市面上已經(jīng)有了許多追蹤染料，但這些染料要么就是熒光信號太弱，要么就是背景太高，都存在很多不足。維思克思曾經(jīng)也深受其害，經(jīng)過長時間的沉淀與積累，我們終于帶來由發(fā)明專利“一種pH敏感型探針分子及其應用、一種探針分子的合成方法”轉(zhuǎn)化而來的示蹤試劑盒！外泌體標記步驟：1試劑準備。使用時將WisTracker提前從-20℃取出，避光解凍后備用。2標記外泌體。將解凍后的WisTracker添加到外泌體溶液中，室溫避光反應30min。3游離探針的去除。推薦用維思克思的WSR0015一步普通離心去除游離探針，得到純凈的熒光標記外泌體。外泌體示蹤步驟：1接種細胞。取合適密度的細胞，接種于共聚焦平皿中置于合適條件下培養(yǎng)。2孵育外泌體。細胞計數(shù)，當細胞生長到70%時，加入熒光標記的外泌體于細胞培養(yǎng)條件下避光孵育2-4h。3清洗與染色。取出平皿，用PBS清洗3次，加入DAPI溶液，室溫避光孵育10min，孵育完成后再用PBS清洗3次。4熒光檢測。在激光共聚焦顯微鏡下觀察細胞和外泌體，并拍照記錄。外泌體研究橫跨生物、醫(yī)學、美妝等多領(lǐng)域，是當下前沿的交叉學科方向。黃芪外泌體Extracellular Vesicles應用

依托攜帶的生物分子，外泌體可影響細胞分化進程，助力機體組織正常發(fā)育。蘋果sEVs裝載

免疫細胞是外泌體分泌**為活躍的群體之一，免疫系統(tǒng)利用外泌體在細胞間傳遞抗原信息、調(diào)控免疫應答強度與類型，維持免疫穩(wěn)態(tài)。樹突狀細胞（DC）分泌的外泌體（dexosomes）是這一領(lǐng)域的明星分子：成熟DC來源的外泌體攜帶主要組織相容性復合體-抗原肽復合物和共刺激分子（CD80、CD86），可直接***CD8+ T細胞，誘導特異性抗腫瘤免疫應答；而非成熟DC來源的外泌體缺乏共刺激分子，反而誘導免疫耐受，在自身免疫性疾病和移植排斥中具有***價值。巨噬細胞極化為M1型（促炎）或M2型（***）后，其外泌體的分子譜也發(fā)生相應轉(zhuǎn)變，M1外泌體富含促炎性微小RNA（如miR-155），可誘導受體巨噬細胞向M1極化，形成炎癥正反饋；而M2外泌體則傳遞***信號。此外，調(diào)節(jié)性T細胞（Treg）分泌的外泌體通過傳遞miR-150等分子，抑制效應T細胞的增殖與功能。這種由外泌體介導的免疫調(diào)節(jié)網(wǎng)絡，為開發(fā)疫苗佐劑、自身免疫病***及抗移植排斥策略提供了豐富的干預靶點。蘋果sEVs裝載

維思克思生物科技(武漢)有限公司在同行業(yè)領(lǐng)域中，一直處在一個不斷銳意進取，不斷制造創(chuàng)新的市場高度，多年以來致力于發(fā)展富有創(chuàng)新價值理念的產(chǎn)品標準，在湖北省等地區(qū)的機械及行業(yè)設備中始終保持良好的商業(yè)口碑，成績讓我們喜悅，但不會讓我們止步，殘酷的市場磨煉了我們堅強不屈的意志，和諧溫馨的工作環(huán)境，富有營養(yǎng)的公司土壤滋養(yǎng)著我們不斷開拓創(chuàng)新，勇于進取的無限潛力，維思克思生物科技供應攜手大家一起走向共同輝煌的未來，回首過去，我們不會因為取得了一點點成績而沾沾自喜，相反的是面對競爭越來越激烈的市場氛圍，我們更要明確自己的不足，做好迎接新挑戰(zhàn)的準備，要不畏困難，激流勇進，以一個更嶄新的精神面貌迎接大家，共同走向輝煌回來！

維思克思生物科技（武漢）有限公司（以下簡稱“公司”）是一家專注建設工業(yè)級外泌體生產(chǎn)制造平臺的高新技術(shù)企業(yè)，以外泌體為主，開發(fā)新一代外泌體創(chuàng)新藥物及再生醫(yī)學產(chǎn)品。

公司總部位于風景秀麗的中國武漢光谷生物城，并在陜西西安設有西北大學聯(lián)合研發(fā)中心。公司已發(fā)表二十余篇高水平研究論文及十余項發(fā)明專利和軟件著作權(quán)，并取得國家高新技術(shù)企業(yè)、國家科技型中小企業(yè)、湖北省創(chuàng)新型中小企業(yè)、武漢市“光谷3551人才計劃”企業(yè)等多項榮譽資質(zhì)，技術(shù)和研發(fā)實力雄厚。
公司創(chuàng)始團隊由國內(nèi)比較早的一批開展外泌體基礎(chǔ)研究的科學家、經(jīng)驗豐富的藥物研發(fā)及工藝開發(fā)技術(shù)人員，以及商業(yè)化人士組建而成。經(jīng)過十余年研究積累，目前已構(gòu)建技術(shù)研發(fā)、生產(chǎn)制造、產(chǎn)品開發(fā)、新藥開發(fā)的完整技術(shù)鏈條，具備穩(wěn)定、多樣的外泌體工程化改造體系及工業(yè)級外泌體生產(chǎn)體系。同時，開發(fā)的外泌體高產(chǎn)無血清培養(yǎng)基及高效分離介質(zhì)，能提升外泌體產(chǎn)量及純化效率，降低生產(chǎn)成本，推動外泌體在醫(yī)藥、醫(yī)療、醫(yī)美等領(lǐng)域的產(chǎn)業(yè)應用。